Suivi – Analyses

Suivi – Analyses

Crédit photographique : P. Massit/ONCFS

Analyses et indicateurs

La répartition des loups en France

Objectifs :
suivre l’expansion du loup sur le territoire français ;
– délimiter des secteurs de présence et définir des zones d’éligibilité à la mesure de protection des troupeaux contre la prédation (cercles 1 et 2).

Protocole : suivi extensif opportuniste.

Le premier degré du suivi du loup se fait au niveau du territoire national et consiste à relever des indices de présence afin de savoir où est le loup. Ce suivi est réalisé par les correspondants du réseau Loup-lynx de manière extensive (sur un territoire très étendu) et opportuniste.

La compilation des indices de présence et des constats d’attaques aux troupeaux domestiques sert à établir la carte de répartition du loup. Actuellement, l’unité géographique de restitution de la présence est la commune. Elle évoluera prochainement vers une transcription sur un quadrillage géographique de 10 × 10 km, standard, utilisé au niveau européen.

Comme le loup est une espèce discrète, afin d’éviter les défauts d’observation, ces cartes sont basées sur la synthèse de deux années de suivi biologique. Elles classent les communes en présence dite régulière et occasionnelle, sur la base de l’abondance et de la récurrence des indices de présence du loup au cours des deux biennales chevauchantes passées.

Crédit photographique : P. Massit/ONCFS

Les zones de présence permanente (ZPP)

Objectif :
– suivre l’évolution du nombre de groupes sédentarisés.

Protocole : suivi hivernal et suivi estival.

L’évolution du nombre de groupes sédentarisés est un bon indicateur de l’évolution générale de la population. L’indicateur des zones de présence permanente (ZPP) est mis à jour deux fois par an à l’occasion de deux protocoles complémentaires : le suivi hivernal et le suivi estival.

Suivi hivernal – Identifier la taille des groupes
Le suivi hivernal renseigne sur la taille des groupes et la présence ou non de meutes. Il consiste en la recherche d’empreintes et de pistes sur un ensemble d’itinéraires. Les empreintes, les pistes et leurs aiguillages permettent d’estimer un nombre minimal d’individus dans les groupes. Ces prospections sont réalisées en cherchant à optimiser la couverture spatiale du territoire et ceci tout au long de l’hiver, sur chaque ZPP. Ces relevés sont réalisés entre novembre et mars, période durant laquelle la cohésion sociale des meutes est la plus forte.

Suivi estival – Confirmer la reproduction
Le suivi estival est conduit sur des territoires de présence connue, abritant à la fin de l’hiver précédent au moins deux animaux, ou sur des territoires où la connaissance est à approfondir (par exemple : est-on en présence d’une ou de deux meutes ?). Ayant lieu l’été (d’août à mi-septembre), il consiste à provoquer, par simulation de leurs hurlements, la réponse des loups. Dans de bonnes conditions, une oreille avertie identifiera les louveteaux qui hurlent dans des tonalités très différentes des adultes. L’objectif est ainsi de confirmer la reproduction et donc le statut de « meute » du groupe.

L’ensemble de ces indices sert à établir des cartes de zones de présence permanente (ZPP) en distinguant les statuts « meutes » (à compter de trois individus ou dès qu’une reproduction est mise en évidence) et « non-meutes » (un ou deux individus sans reproduction avérée).

Crédit photographique : Y. Léonard/ONCFS

Les indicateurs démographiques

Objectifs :
– suivre l’évolution démographique de la population de loups ;
– définir l’effectif moyen de loups servant de base au calcul du nombre maximum de loups autorisés à être prélevés

Protocole : suivi hivernal, suivi opportuniste, génétique.

La connaissance du nombre exact de loups est l’objet de nombreux débats et de tensions. Rares sont les pays qui proposent une estimation précise de leur population lupine. En France, la gestion actuelle de la population de loups nécessite un recensement le plus précis possible. Pour ce faire, l’ONCFS déploie des moyens importants pour le comptage des loups à un niveau rarement déployé à l’échelle internationale.

Tendance d’évolution de la population : l’Effectif Minimum Retenu « EMR »
Les variations d’effectifs au sein des meutes sont les résultats des flux d’entrée (reproduction-immigration) et de sortie (émigration-mortalité).
Les indices permettant d’estimer les effectifs minima d’animaux résidents dans les zones de présence permanente sont les relevés de traces, les observations visuelles et les hurlements.

EMR – Comment l’interpréter ?
L’EMR porte bien mal son nom ! En effet, « l’Effectif Minimum Retenu » représente en réalité un indicateur de tendance de l’évolution de la population, et non pas le nombre total de loups, comme son appellation pourrait laisser supposer !
Les effectifs détectés sont bien des minima d’animaux vivants car les loups ne se déplacent pas toujours ensemble. De plus, on ne peut pas détecter tous les animaux. La somme des EMR toutes ZPP confondues pour une année donnée ne représente pas la taille de la population totale de loups en France car les individus en dispersion n’y sont pas pris en compte. Ainsi, la variation de l’EMR national au cours des années est utile pour suivre la tendance de l’évolution de la population de loup.

L’effectif estimé de la population totale de loups : la méthode dite de Capture-Marquage-Recapture « CMR »
Dans la nature, le comptage exhaustif de tous les individus d’une espèce présents sur un site est impossible. C’est d’autant plus vrai pour les espèces qui couvrent un vaste territoire et dont les habitudes de vie restent discrètes comme un prédateur tel que le loup.

Il existe depuis longtemps des méthodes d’estimation des effectifs de populations d’animaux sauvages. Ces méthodes statistiques reposent généralement sur la capture d’individus (échantillon représentatif de la population), leur marquage (type collier/bague) et leur recapture ultérieure. Cette méthode porte le nom de capture, marquage et recapture (CMR). Dans le cas du loup, ce ne sont pas les individus que l’on capture mais leur ADN (grâce aux déjections, sang et poils que les animaux laissent sur le terrain) ! L’analyse de l’ADN permet d’obtenir un profil génétique de l’individu. On dit dans ce cas qu’il s’agit d’une méthode non invasive, car elle n’implique pas de manipulations de l’animal. Il serait d’ailleurs irréaliste d’envisager la capture physique des loups au regard du coût et des moyens humains à y consacrer !
Ce sont donc ces signatures génétiques individuelles capturées au cours du temps et des collectes d’échantillons sur le terrain qui, par application de modèles statistiques (c’est là que les mathématiques entrent en jeu, notamment pour tenir compte des événements démographiques et estimer la part de ce qui ne peut pas être vu), vont permettre d’estimer l’effectif de loups en France.

Effectifs estimés de la population totale de loups

Crédit photographique : P. Massit/ONCFS

Le suivi génétique : espèce, lignée, profil individuel et hybridation

Description des analyses génétiques

L’analyse génétique réalisée à partir des indices biologiques reste délicate, d’autant plus que les quantités d’ADN retrouvées sont souvent très faibles et dégradées, nécessitant l’emploi de technologies de pointe.
L’ADN provient des cellules de l’animal retrouvées en partie dans les échantillons biologiques (crottes, sang, urine, poils, tissus) qui ont été recueillis sur le terrain, ainsi qu’à partir des dépouilles de loups.
La première étape repose sur l’extraction, la purification, puis l’amplification de l’ADN.
Deux types d’ADN peuvent être analysés : l’ADN nucléaire et l’ADN mitochondrial. L’ADN mitochondrial (présent dans les mitochondries des cellules) est hérité intégralement de la mère et l’ADN nucléaire (présent sous forme de chromosomes dans le noyau des cellules) pour moitié des deux parents.

ADN mitochondrial : espèce et lignée

Les analyses génétiques réalisées au niveau mitochondrial permettent de déterminer l’espèce et la lignée génétique.
La caractérisation de l’ADN mitochondrial se fait par séquençage (ou « lecture ») de sa région de contrôle.

Cette région non codante est très stable et les séquences typiques de chaque espèce et de chaque sous espèce sont référencées dans des banques mondiales de dépôt (Genebank). Au sein d’une même espèce quelques points de mutation se sont créés au cours du temps dans certaines populations, qu’elles soient isolées, ou au contraire au contact les unes des autres. Cet ADN mitochondrial est donc la marque populationnelle de l’animal. 

Il existe ainsi plusieurs haplotypes spécifiques de chaque lignée génétique de loup. En France et en Italie, tous les animaux analysés sont porteurs de l’haplotype w22, sauf deux individus d’origine inconnue porteur de l’haplotype w1.

Avec l’augmentation de l’aire de répartition des populations de loup, la rencontre entres lignées italo-alpines et celles d’Europe de l’Est ou d’Espagne est probable à moyen terme.

ADN nucléaire : profil individuel et hybridation


Profil individuel
Les analyses génétiques réalisées au niveau de l’ADN nucléaire permettent d’établir une empreinte génétique individuelle constituée de 22 marqueurs microsatellites et d’un marqueur de sexe, dont 11 marqueurs microsatellites spécifiquement sélectionnés pour la détection de l’hybridation entre le chien et le loup. Ces 22 marqueurs sont une représentation de la totalité du génome qui comporte plus de 20 000 gènes. Cette représentation a été étudiée préalablement pour être très robuste dans l’identification de chaque individu.
Les profils individuels sont notamment utilisés pour le suivi de la population et le calcul des effectifs par la méthode CMR .

Hybridation
L’hybridation ne peut être décelée que par une analyse fine de l’ADN hérité des deux parents (ADN nucléaire). Pour deux espèces extrêmement proches comme le loup et le chien (plus de 99 % d’ADN commun), un panel de marqueurs permet d’assigner, par une méthode statistique, des combinaisons caractéristiques d’allèles des différentes populations susceptibles de se croiser (loups et chiens) et de leurs hybrides.
Les profils génétiques individuels obtenus à partir des 22 marqueurs sont comparés à deux populations de référence : celles des loups italo-alpin et celles des chiens couvrant une grande variété de races (y compris les races connues de chien-loup).

Le choix de la population de référence (ici italo-alpine) revêt une importance toute particulière. En effet si la carte d’identité de l’individu était comparée à l’ensemble des populations de loup, les chances de trouver un hybride seraient noyées dans la diversité génétique mondiale. Ainsi le choix de scanner uniquement la population de référence dans laquelle l’animal se trouve nous permet de d’améliorer le pouvoir de détection des hybrides. Toutefois l’identification d’une autre lignée que celle présente en France (w22) est repérée avant dans la phase d’analyse mitochondriale.

L’analyse ne mesure pas un ADN de chien versus de loup dans le génome de l’animal scanné mais donne une probabilité que l’échantillon appartienne à l’une ou l’autre des espèces de référence (loup et chien). Une probabilité de 50% est attendue pour louveteau né d’un croisement loup-chien de première génération (dit F1) et dans le même raisonnement le rétrocroisement d’un hybride F1 avec un loup, une probabilité de 75% serait attendue. Cependant ces probabilités sont entachées d’un intervalle de confiance nécessitant alors un regard d’expert généticien.